pbst缓冲液作用(探究PBST缓冲液的使用及其功效)
探究PBST缓冲液的使用及其功效
什么是PBST缓冲液?
PBST缓冲液,全称为Phosphate-buffered saline(PBS)Triton™ X-100缓冲液,是常用于细胞膜通透性研究中的缓冲液。其主要组成包括Phosphate Buffer Saline(PBS)、Tween 20和Triton X-100。
PBST缓冲液的作用
一般情况下,PBST缓冲液主要有以下两个作用:
1. 细胞膜通透性的研究
在分析调节膜通透性的功能蛋白质时,使用PBS(pH = 7.4)含0.05%V/V的Tween20加入的PBST缓冲液,可以避免细胞膜蛋白质从膜中解离。同时不影响膜蛋白离子通道的活性。PBST缓冲液中的Tween 20起到增强膜蛋白在样品样本中的溶解度的作用。
2. 免疫学研究
PBST缓冲液主要用于洗涤和稀释抗原样品以及配制一般用于免疫学实验的缓冲液。
如何使用PBST缓冲液
PBST缓冲液的使用方式也有一些要注意的地方:
1. 使用时应根据实验需要酌情调整缓冲液的pH值。
使用PBS作为缓冲液时,往往会通过调节pH值使实验更加准确。例如,在免疫印迹实验中,如果暴露时间过长,容易产生自发性亚硫酸酯结合反应(这种反应可能破坏膜表面抗原的特异性)。此时使用含有0.1〜0.3%V/V的Tween20的PBS缓冲液,pH值为7.4。
2. 使用时应严格按照实验所需加入相应的试剂。
例如,在洗板实验中,PBST缓冲液除了含有PBS还不同加入如0.05%V/V的Tween 20或0.1%V/V的Triton X-100来更好的贴合特定的实验场景。
3. 保存的时候应将其储存在冰箱中。
PBST缓冲液的使用完后应及时冷藏以避免其实效的降低。另外,避免让其暴露在阳光下,以免影响其品质。
PBST缓冲液是分析细胞膜通透性与免疫学方面不可缺少的缓冲液,其使用及储存方法非常重要。了解PBST缓冲液成分、功能及作用等方面的知识,可以帮助实验实现更加准确的结果。